อายาเมะ คุโนอิจิสาวรับภารกิจแทรกซึมเพื่อสืบข้อมูลลับจากโยชิดะ โทชิมาโร่ โดยใช้เสน่ห์ล่อลวงจนทราบถึงแผนการก่อจลาจลในเกียวโต ในขณะเดียวกันกลุ่มชินเซนกุมิได้บุกจู่โจมที่ร้านอิเคดายะเพื่อกวาดล้างผู้ก่อการ นำไปสู่จุดจบของโทชิมาโร่และการเริ่มต้นภารกิจใหม่ของอายาเมะที่มีเป้าหมายคือซากาโมโต้ เรียวมะ